產(chǎn)品名稱：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因編輯試劑盒）

貨號(hào)：MJ5460

規(guī)格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒，華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎咨詢

組分：

Solution I (eSpCas9)：75μL（1.5 μL/rxn）

Solution II (buffer)：2.5mL（50 μL/rxn）

儲(chǔ)存條件：

短期：解凍后-20℃（避免反復(fù)凍融）

長期：未開封-80℃；開封后長期不用需-80℃

有效期：18個(gè)月

核心技術(shù)與優(yōu)勢

自遞送CRISPR/SpCas9系統(tǒng)：

無需電轉(zhuǎn)儀，直接原代細(xì)胞（如T細(xì)胞）和細(xì)胞系高效編輯。

敲除（KO）/敲入（KI）效率：85-90%

低脫靶率 + 無細(xì)胞毒性

實(shí)驗(yàn)流程（以人原代T細(xì)胞為例）

一、轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物制備

混合1.5μL SgRNA（100μM） + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分鐘（形成RNP）。

加50μL Solution II（室溫預(yù)平衡） → 混勻后室溫靜置5分鐘。

二、細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)

細(xì)胞預(yù)處理：激活T細(xì)胞48小時(shí)后洗滌，離心去培養(yǎng)基（用OptiMEM/PBS清洗殘留）。

細(xì)胞沉淀重懸于轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物 → 37℃孵育45分鐘。

三、培養(yǎng)與檢測

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基 → 接種至24孔板（密度2-3×10?/mL）。

培養(yǎng)4-5天后檢測編輯效率。

關(guān)鍵注意事項(xiàng)

應(yīng)用場景 操作要點(diǎn)

AAV輔助KI AAV體積≤5μL：RNP制備階段加入；>5μL：細(xì)胞培養(yǎng)階段加入（MOI: 2×10?-5×10?）

多基因編輯 方案A：混合多靶點(diǎn)RNP；方案B：分步轉(zhuǎn)導(dǎo)（間隔48小時(shí)，≤2基因/次）

細(xì)胞狀態(tài) 轉(zhuǎn)導(dǎo)前活性>90%

電轉(zhuǎn)兼容性 Solution I（eSpCas9）可單獨(dú)用于電轉(zhuǎn) → 效率較野生型提升30%

產(chǎn)品名稱：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因編輯試劑盒）

貨號(hào)：MJ5460

規(guī)格：50 rxn

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